Экспозиция детально раскрывает роль Дома Романовых в освоении и развитии Уральского региона и рассказывает о непосредственной связи с Екатеринбургом и другими уральскими городами таких представителей династии, как император Александр I, наследник-цесаревич и будущий император Александр II, зять императора Николая I — главноуправляющий Корпуса горных инженеров герцог Максимилиан Лейхтенбергский, сыновья Александра II — Великие князья Владимир Александрович и Алексей Александрович.
Наиболее тесные отношения Дома Романовых с Екатеринбургом связаны с проведением Сибирско-Уральской научно-промышленной выставки в 1887 году, организованной по инициативе Уральского общества любителей естествознания (УОЛЕ). Почетным президентом выставки, а затем и Августейшим покровителем УОЛЕ выступил председатель Государственного Совета Российской империи Великий князь Михаил Николаевич. После его смерти покровителем Общества и музея при нем стал Великий князь Николай Михайлович — известный русский историк. Почетными членами УОЛЕ на рубеже XIX–XX веков были еще шесть представителей Императорского Дома. Именно эта непосредственная связь Музея УОЛЕ, от которого ведет свою историю Свердловский областной краеведческий музей, с Домом Романовых, впервые показана в новой экспозиции.
Специальный раздел экспозиции посвящен биографии императора Николая II. В 2023 году исполнилось 155-лет со дня рождения этого последнего императора из династии Романовых. В год 105-летия гибели царской семьи в Екатеринбурге эта трагическая тема прозвучит одной из главных в новой экспозиции, как и темы идентификации останков и увековечения памяти погибших в Екатеринбурге, Перми и Алапаевске членов Дома Романовых.
Монахини Александро-Невского Ново-Тихвинского монастыря специально для экспозиции написали икону с изображением Святых Царственных Страстотерпцев. Посетители увидят ее в завершающем зале.