Сюжет картины заимствован Репиным из Ветхого Завета «Книга Иова». Иов — один из самых известных праведников, образец веры и терпения.

Некогда семья Иова была процветающей: любимая жена, семь сыновей и три дочери, богатое хозяйство и скот. Иов имел все, о чем только можно мечтать: любимую жену, семерых сыновей и трех дочерей и несметные богатства — верблюдов, скот, множество слуг.

Счастью и вере Иова позавидовал дьявол и перед лицом Бога стал утверждать, что Иов праведен только благодаря своему мирскому счастью, с потерей которого исчезнет и все его благочестие. Господь послал Иову страшные испытания: бедность, болезни, смерть всех детей. Проказа, которой болел Иов, вынудила его покинуть родной город и жить отшельником. От Иова отвернулись все, даже его жена, которая не могла понять его непоколебимой веры в Бога.

Репин запечатлел момент, когда друзья Иова пришли навестить его, сломленного, потерявшего всё, больного старика, обитающего в пустыне.

Конец истории Иова, который ни разу не пожаловался на свою жизнь и не роптал на Бога, несмотря на ужасные испытания, имеет счастливое завершение — за искреннюю веру Господь заново даровал Иову счастливую жизнь, новую жену и детей.