Начиная с эпохи Возрождения художники часто обращались к изображению сюжета, повествующего о подвиге Юдифи. Сюжет картины близко следует ветхозаветному преданию: иудейская вдова Юдифь, прокравшаяся вместе со служанкой Аброй в палатку ассирийского военачальника Олоферна, обезглавила его спящим, лишив ассирийские войска их предводителя и тем самым обеспечив победу своего народа над врагом. Драматичная композиция Джентилески передает пограничный момент между жизнью и смертью: Олоферн, борящийся со служанкой Аброй, хватает ее за ворот, в то время как его глаза закатываются.

Помимо полотна Караваджо исследователи указывают и на работы других художников, послуживших источником при создании неаполитанской композиции. Это выполненная на меди работа Адама Эльсхаймера на тот же сюжет и композиция Орацио Джентилески из музея в Хартфорде. Из другой картины своего отца — «Давид с головой Голиафа» из музея в Дублине — художница, по всей видимости, использовала в качестве образца изображение фигуры Голиафа для передачи сложного ракурса тела Олоферна. Было также высказано предположение, что Артемизия могла воспользоваться и композицией Рубенса, известной как «Большая Юдифь», либо, что вероятнее, гравюрой с нее Корнелиуса Галле.Помимо полотна Караваджо исследователи указывают и на работы других художников, послуживших источником при создании неаполитанской композиции. Это выполненная на меди работа Адама Эльсхаймера на тот же сюжет и композиция Орацио Джентилески из музея в Хартфорде. Из другой картины своего отца — «Давид с головой Голиафа» из музея в Дублине — художница, по всей видимости, использовала в качестве образца изображение фигуры Голиафа для передачи сложного ракурса тела Олоферна. Было также высказано предположение, что Артемизия могла воспользоваться и композицией Рубенса, известной как «Большая Юдифь», либо, что вероятнее, гравюрой с нее Корнелиуса Галле.