Литературным источником для этого изображения стала «Повесть о Петре и Февронии Муромских», которую написал Ермолай-Еразм во времена царя Ивана Грозного. Ермолай-Еразм был известным церковным писателем и публицистом. Митрополит Макарий поручил ему написать повесть о муромских святых, потому что на церковном соборе 1547 года началась подготовка к их канонизации. Первоначально повесть задумывалась как уставное чтение для праздничного бдения в день памяти муромских чудотворцев.

В среднике иконы помещено изображение Петра и Февронии в монашеских ризах. Они молятся Иисусу. Вокруг расположены тридцать два крупных клейма. Все персонажи на них имеют выразительные лики, тщательно прорисованные фигуры и «говорящие» жесты.

Иконография образа нетрадиционна. Иконописец не столько показал подробности земной жизни святых, сколько прославил их и воздал им почитание. С помощью изобразительных средств автор создал традиционное житие. Он идеализировал своих героев и убрал из их биографии все те эпизоды, которые связаны с фольклорными мотивами и которые чужды христианскому мировоззрению. 

Значительная часть клейм иконы посвящена церковным обрядам и таинствам: венчанию, крестным ходам, постригу, отпеванию, перенесению мощей — причем иконография этих сцен часто перекликается с другими сюжетами, такими как Вход в Иерусалим, Успение, Сретение Владимирской иконы Богоматери. Особое место отведено чудесам с процветшими деревцами и с соединением тел святых в одном гробе.

На обороте иконы сохранилась вкладная надпись: «Поставил сеи образ в Муромев соборную церковь пречистыя Богородицы честнаго и славнаго ея Рождества, в дом великим чюдотворцам муромским князю Петру и княгине Февронии государев воевода многогрешныи Андрей Федоров сын Палицын лета 7126 марта в 13 день».