На картине неизвестного итальянского художника представлен популярный в западноевропейской живописи сюжет из Ветхого Завета. Библейская история рассказывает о том, как во время вавилонского пленения еврейского народа супруга знатного и благочестивого Иоакима — Сусанна была оклеветана двумя старейшинами, которые прельстились красотой молодой женщины, увидев ее в купальне. Они задумали обольстить добродетельную Сусанну, а когда им это не удалось, напали на нее, угрожая, что в случае отказа обвинят ее в прелюбодеянии. Супружеская измена каралась побиением камнями, однако Сусанна не поддалась на уговоры и стала звать на помощь. Старейшины оклеветали невинную женщину перед судом, и ей грозила жестокая смерть. Спасти Сусанну смог пророк Даниил, который допросил каждого из обвинителей отдельно и нашел противоречия в их свидетельствах. Жестокие и лживые старейшины сами были осуждены, а истина восторжествовала.
В эпоху Ренессанса и барокко художники, изображая историю из книги пророка Даниила, чаще всего обращались не к эпизоду с правосудием, а к сцене в купальне, где старцы посягают на красоту и добродетель Сусанны. Этот сюжет давал живописцам законную возможность изображения обнаженной модели. Обращаясь к мотиву женской наготы, мастера эпохи Ренессанса ориентировались на возвышенные образцы античного искусства, а у художников стиля барокко этот сюжет обрел более чувственную эмоциональную трактовку.
Неизвестный итальянский мастер, написавший полотно «Сусанна и старцы» испытывал воздействие мастеров знаменитой Болонской школы, о чем говорят приемы изображения обнаженной женской фигуры, формы которой трактованы со скульптурной объемностью и ясностью. При этом, художник не избегает показа эмоций своих героев. Композиция картины динамична, драматизм усиливает и контрастное освещение. Художник внимателен к деталям, он изображает на первом плане жемчужное ожерелье Сусанны, лежащее на камнях. Эта символическая деталь помогает раскрыть содержание сюжета, так как жемчуг в иконографии классического западноевропейского искусства выступает как символ чистоты и непрочности, но в то же время и как символ Божьего Слова, что связано с темой пророческой мудрости Даниила, оправдавшего неправедно осужденную Сусанну.
